【摘要】 目的 研究慢性牙周炎和牙周健康者血漿一氧化氮(NO)的水平差異,以及NO水平與牙周炎癥的相關(guān)性。方法 選擇慢性牙周炎患者22人作為實(shí)驗(yàn)組,牙周健康者40人作為對照組。分別采集清晨空腹靜脈血，分離血漿樣本,采用硝酸還原酶法測定其中NO水平。結(jié)果 牙周健康者和慢性牙周炎患者血漿NO含量分別為(86.65±40.45)μmol/L和(145±48.9)μmol/L,二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),慢性牙周炎患者血漿NO水平明顯升高，經(jīng)基礎(chǔ)治療后NO含量顯著下降。血漿NO水平與牙周炎癥程度具有正相關(guān)關(guān)系(P<0.01)。結(jié)論 慢性牙周炎患者血漿NO水平顯著高于牙周健康者,并與牙周炎嚴(yán)重程度相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 血漿一氧化氮 牙周炎 相關(guān)性

一氧化氮(NO)是一個具有多功能的重要細(xì)胞內(nèi)信使^①,血管內(nèi)皮細(xì)胞是體內(nèi)合成NO最主要的細(xì)胞。NO是一重要的血管活性因子, 使血管舒張并維持血管張力。對于NO在牙周病發(fā)病過程中的研究，學(xué)者們進(jìn)行了一些相關(guān)的研究。

1 材料與方法

1.1 研究對象 為2007年6月—2008年3月來我院體檢和門診就診者。正常對照40例,為健康者,均無牙周、粘膜等方面的疾病,男23例,女17例,年齡25～53歲。慢性牙周炎患者22例,男14例,女8例,年齡19～56歲。所有研究對象均知情同意并符合:①全身健康、無系統(tǒng)性疾病;②3個月內(nèi)未服用抗生素及非甾體類抗炎藥物;③6個月內(nèi)未行牙周治療;④女性未妊娠;⑤無吸煙嗜好。正常對照組與牙周炎組的年齡均無顯著性差異( P>0.05)。

1.2 標(biāo)本的采集及處理 實(shí)驗(yàn)組與對照組均于清晨空腹采肘靜脈血2ml,置于含10%EDTA二鈉30μl 和抑肽酶40μl的試管中, 混勻,離心(4℃, 3000rpm,10min),分離血漿,放20℃冰箱保存。測定前使樣本置于室溫中復(fù)融, 再次4℃,3000rpm離心5min, 取上清液測定。實(shí)驗(yàn)組經(jīng)嚴(yán)格的基礎(chǔ)治療，包括齦上潔治術(shù)和齦下刮治及根面平整術(shù)，治療后再次按上述方法測定血漿NO水平。

1.3 測定方法 按NO試劑盒(南京建成生物工程研究所)說明，用硝酸還原酶法檢測血漿樣本中NO水平,每樣本均設(shè)復(fù)管,空白對照為100μL雙蒸水。各樣本分別于721型分光光度計(jì)、550nm波長、0.5cm光徑比色測定光密度,根據(jù)試劑盒提供公式計(jì)算血漿樣本中NO濃度,單位為μmol/L。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)組與對照組比較采用單因素方差分析，治療前后比較采用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組與對照組血漿NO水平的比較 我們經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定血漿NO水平在牙周炎時(shí)顯著高于正常人, 慢性牙周炎患者血漿NO的含量與牙周健康者血漿NO的含量相比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),慢性牙周炎患者血漿NO的含量顯著升高。慢性牙周炎患者與牙周健康者血漿NO水平比較

2.2 實(shí)驗(yàn)組牙周基礎(chǔ)治療前后血漿NO水平的比較 22例慢性牙周炎患者經(jīng)嚴(yán)格的牙周基礎(chǔ)治療，治療后血漿NO水平明顯下降。血漿NO水平與治療前相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 實(shí)驗(yàn)組基礎(chǔ)治療前后血漿NO水平比較。

3 討論

體內(nèi)的NO是由L精氨酸(LArg) 在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS) 的催化下生成L瓜氨酸時(shí)釋放的。由于NO是一種含不成對電子的氣體, 具有自由基結(jié)構(gòu), 生物半衰期極短僅3～5秒, 很快會被氧化為NO2- 和NO3- , 所以檢測組織或體液內(nèi)的NO含量, 可以通過測定NO的代謝終末產(chǎn)物NO2-和NO3-含量間接得知。

有報(bào)道已經(jīng)證實(shí)NO對維持口腔內(nèi)正常菌群的平衡以及抗微生物感染有直接的影響。同時(shí),適量的NO對牙周組織的健康及功能的正常發(fā)揮起著重要的作用。對NO與牙周病的關(guān)系,不同學(xué)者采用了不同的方法進(jìn)行研究。張昕、陳世璋等應(yīng)用免疫組化定量分析發(fā)現(xiàn)牙周病患者牙齦組織中NOS含量比正常牙齦組織中高^②。陳桂珍等通過檢測牙周炎患者唾液NO的含量,發(fā)現(xiàn)牙齦炎和牙周炎患者唾液NO的含量顯著高于健康人,且牙周炎患者明顯高于牙齦炎患者^③。龔斌、徐立平等研究發(fā)現(xiàn)正常狀況下與牙齦炎癥狀態(tài)下牙齦組織內(nèi)NO含量有顯著性差異,牙齦組織NO含量則與牙齦指數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)^④.已有研究發(fā)現(xiàn)牙周治療前后^⑤⑥，收集慢性牙周炎患者的牙齦組織，觀察誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)，牙周治療前有大量炎癥細(xì)胞浸潤的標(biāo)本中，誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)明顯增加，而治療后則下降。

NO是由內(nèi)皮細(xì)胞及某些神經(jīng)細(xì)胞釋放的體內(nèi)主要的舒張血管物質(zhì)。內(nèi)源性NO可直接導(dǎo)致血管擴(kuò)張并可調(diào)節(jié)血流和血壓,還可抑制血小板在內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附及血小板聚集作用。在牙周炎癥狀態(tài)下，血漿ET的含量顯著增高，而NO的水平也相應(yīng)增高，來對抗ET所造成的牙周組織小血管及微血管的強(qiáng)烈收縮，屬于一種防御反應(yīng)。在這個防御反應(yīng)的過程中，過量產(chǎn)生的NO會引起牙周組織破壞，并參與牙周病的發(fā)病，間接地造成了牙周組織的損傷，具體的損傷機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

我們通過檢測血漿NO水平來觀察血漿NO水平與牙周炎的關(guān)系，這種方法采集標(biāo)本簡單，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。我們的結(jié)果顯示慢性牙周炎患者血漿NO水平顯著高于牙周健康者;慢性牙周炎患者經(jīng)嚴(yán)格的牙周基礎(chǔ)治療后，血漿NO水平明顯下降，其差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。我們的結(jié)論也證實(shí)了慢性牙周炎患者其血漿NO水平顯著高于牙周健康者，與先前的研究牙齦組織及唾液的NO含量變化相一致。

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